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簡要描述：細胞周期檢測技術(shù)：細胞周期是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分烈期兩個階段。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期測定細胞周期的方法很多，常用的是PI滲入測定細胞周期。
更新時間：2023-10-30廠商性質(zhì)：代理商訪 問 量：1029產(chǎn)品分類
Product Category詳細介紹
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細胞周期檢測技術(shù)實驗步驟
實驗共分以下4個主要步驟:
1.細胞鋪盤
HeLa S3細胞，密度為80%左右分盤，使鋪盤密度在50%左右，為滿足流式細胞儀上機要求，細胞數(shù)目需大于1x10°/組。
2.細胞同步化處理:
a)加入終濃度2mM的Thymidine同步化18h
b) 用溫育的PBS洗4次，更換新鮮培養(yǎng)基，培養(yǎng)9h
c) 再加入2mM Thymidine再次同步化18h后
3.樣品收集 ;
a) 分別收取釋放2h(S期)，6h(G2/M期)和12h(G1期)細胞樣品
b) 每個樣品收取都使用預冷的PBS洗滌4次，1000g離心5min，棄上清
c) 100uL PBS重懸沉淀，吸取出細胞懸液于移液器中，于移去細胞的管中加入900uL預冷的70%乙醇，漩渦振蕩器震蕩中滴
入細胞懸液。
d)4℃固定一小時或更長時間。
e)1500rmp，離心10min，去固定液。
f)細胞染色液配制:50xRNaseA母液:50xPI母液:PBS=20:20:960;RNaseA母液濃度1mg/mL，工作濃度20ug/mL;PI母液濃度2.5mg/mL，工作濃度50ug/mL。
g) 細胞37度染色1h。根據(jù)細胞量，加入一定體積的細胞染色液(1~1.5mL)重懸，使上機時細胞通過率為200~350Cell/s,染色液不可過多或過少，過多則細胞密度過低上機速度嚴重不足，過少則導致細胞粘結(jié)。
h) 300目篩網(wǎng)過濾至流式管中。
4.上機檢測;
流式細胞儀上機檢測，計數(shù)50000個細胞。
5.同步化數(shù)據(jù)分析
細胞周期檢測技術(shù)
我們擁有專業(yè)的實驗室、精良的實驗設備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應用與推廣。通過高度細分、較好的的服務平臺，為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務。目前，及，涉及臨床醫(yī)學、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學、分子生物學等生命科學、醫(yī)學等諸多領(lǐng)域。
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