MSP甲基化檢測

簡要描述：MSP甲基化檢測：甲基化特異性PCR（Methylation-Specific PCR，MSP）是一種用于檢測DNA甲基化狀態(tài)的高靈敏度技術(shù)。其基本原理是利用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，使未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)化為niao嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后，設(shè)計(jì)針對甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物，從而確定DNA序列的甲基化狀態(tài)。

更新時(shí)間：2025-02-21
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甲基化特異性PCR（Methylation-Specific PCR，MSP）是一種用于檢測DNA甲基化狀態(tài)的高靈敏度技術(shù)。其基本原理是利用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，使未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)化為niao嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后，設(shè)計(jì)針對甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物，從而確定DNA序列的甲基化狀態(tài)。以下是MSP甲基化檢測的詳細(xì)步驟和注意事項(xiàng)：

MSP的基本原理是用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)化為niao嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶（5mC）保持不變。隨后，設(shè)計(jì)兩對特異性引物，分別針對甲基化和非甲基化序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增。如果用針對甲基化DNA鏈的引物能擴(kuò)增出片段，則說明該位點(diǎn)存在甲基化；反之，說明該位點(diǎn)不存在甲基化。

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